1.一種常溫保存核酸擴增試劑的方法，其特征在于，將核酸擴增試劑中的部分試劑或全部試劑，通 過固化工藝轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)，從而實現(xiàn)核酸擴增試劑能在常溫下穩(wěn)定保存，進而實現(xiàn)核酸檢測試劑盒在常溫下 穩(wěn)定保存。 

  2.如權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述的常溫是指在9～45℃的溫度范圍內(nèi)，所述的穩(wěn)定保存 是指**少保存3個月后，各試劑的生物、物理和化學等性能變異系數(shù)CV小于10%。 

  3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸擴增試劑包括如下組分： 

  組分A：核酸擴增試劑中能在常溫液態(tài)和固態(tài)下穩(wěn)定保存的組分，包括：水、Tris-HCl，MgSO4，甜 菜堿，(NH4)2SO4，NaCl，MgCl2，曲拉通； 

  組分B：核酸擴增試劑中在常溫液態(tài)下不一定穩(wěn)定而在常溫固態(tài)下能穩(wěn)定保存的組分，包括：脫氧核 苷三磷酸，引物、探針或其他核苷酸序列以及帶小分子標記的引物、探針或其他核苷酸序列； 

  組分C：核酸擴增試劑中在常溫液態(tài)下不穩(wěn)定而在固態(tài)下穩(wěn)定的組分，包括：Taq DNA聚合酶、Tth DNA 聚合酶、Vent DNA聚合酶、Pwo DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶、Bst DNA聚合酶、T7RNA聚合酶、 AMV逆轉(zhuǎn)錄酶、MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶。 

  4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，實現(xiàn)核酸擴增試劑的常溫下穩(wěn)定保存，**少需要固化 所述組分C，將所述組分A和所述組分B以液態(tài)形式穩(wěn)定儲存；或者，同時將組分B和組分C固化，將 組分A以液態(tài)形式保存；或者，同時將組分A、組分B和組分C全部固化，整個核酸擴增試劑以固體形 式在常溫穩(wěn)定保存。 

  5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固化工藝是指液態(tài)的核酸擴增試劑組分在固化保護 劑的存在下，通過物理干燥脫水的工藝變成固體；所述物理干燥脫水的工藝，包括：真空抽干工藝、冷凍 真空干燥工藝和烘干工藝。 

  6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述固化保護劑，包括糖、蛋白、表面活性劑、抗氧化 劑和防腐劑；所述糖，包括雙糖和多糖，其使用的終濃度為體積比的0.5～20%；所述蛋白，包括動物血清 與動、植物蛋白，其使用的終濃度為體積比的0.1～15%；所述的表面活性劑包括離子和非離子的表面活性 劑，其使用的終濃度為體積比的0.01～5%；所述的抗氧化劑，包括維生素、超氧化物歧化酶，其使用的終 濃度為體積比的0.01～5%；所述的防腐劑，包括疊氮鈉、硫柳汞、Proclin300，其使用的終濃度為體積比 的0.001～0.1%。   7.一種常溫保存的封閉式核酸層析試紙檢測試劑盒，其特征在于：包括樣本的核酸提取試劑、能在 常溫下保存的核酸擴增試劑和封閉式層析試紙檢測裝置；所述封閉式核酸層析試紙檢測試劑盒是指在封閉 式層析試紙檢測裝置中對常溫保存的核酸擴增試劑的擴增產(chǎn)物溶液通過免疫層析試紙實現(xiàn)快速檢測； 

所述核酸擴增試劑采用權(quán)利要求1-6任一項所述的方法進行常溫保存； 

所述封閉式層析試紙檢測裝置，包括：免疫層析試紙和封閉式檢測裝置；其中免疫層析試紙被固定在 封閉式檢測裝置中，被檢測樣品溶液不能同裝置外部環(huán)境接觸。 

  8.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述核酸擴增試劑的檢測目標對象包括：RNA和DNA； 所述核酸擴增試劑用于從DNA或RNA模板啟動核酸序列的擴增，**終產(chǎn)生遠高于模板起始濃度的且與模 板互補或相同序列的RNA或DNA片段產(chǎn)物，核酸擴增反應(yīng)方法包括：聚合酶鏈式反應(yīng)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈 式反應(yīng)、鏈替代擴增、連接酶鏈式反應(yīng)、依賴核酸序列的擴增、滾環(huán)擴增、轉(zhuǎn)錄介導擴增、實時熒光定量 環(huán)介導恒溫擴增。 

  9.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于：所述的封閉式層析試紙檢測裝置由溶液管，連接管和 試紙管裝配組成： 

  1）溶液管：用于儲存核酸擴增試劑和采用核酸提取試劑提取的DNA或RNA進行擴增反應(yīng)；該溶液 管包括溶液管體和溶液管蓋子；所述溶液管管體內(nèi)壁圓周面上設(shè)有上下兩個凹槽，分別是溶液管內(nèi)部** 凹槽、溶液管內(nèi)部第二凹槽；所述溶液管蓋子的外周設(shè)有凸起密封環(huán)，該溶液管蓋子外周凸起密封環(huán)與溶 液管內(nèi)部**凹槽、溶液管內(nèi)部第二凹槽都能配合密封，溶液管內(nèi)部**凹槽能允許溶液管蓋子重復開啟， 溶液管內(nèi)部第二凹槽則反向倒鉤住溶液管蓋子，使其在一次性受壓入位后形成封閉環(huán)境，不容易被再次打 開；所述溶液管管體外周設(shè)有溶液管外部凹槽，能與連接管對應(yīng)接口內(nèi)設(shè)的凸起密封環(huán)配合形成反向倒鉤 結(jié)構(gòu),形成封閉環(huán)境而不容易被打開；所述溶液管管體底部設(shè)有底部結(jié)構(gòu)，它外周邊緣設(shè)底部切痕，當?shù)?部結(jié)構(gòu)受到一定作用力時，它從底部切痕處斷裂脫離，此時預先分裝在溶液管內(nèi)的樣品溶液能夠從斷裂縫 隙流出； 

  2）連接管：用于將溶液管和試紙管密閉連接起來，并促使釋放溶液管中的核酸擴增反應(yīng)溶液；所述 連接管上設(shè)有一個或多個與所述溶液管下部管體外形匹配的沉孔形接口；所述沉孔形接口內(nèi)設(shè)有溶液管凸 起密封環(huán)，能與插入接口的溶液管外部凹槽配合形成反向倒鉤結(jié)構(gòu)，形成封閉環(huán)境而不容易被再次打開； 該連接管上還設(shè)有一個或多個與試紙管匹配的接口，該接口內(nèi)設(shè)有試紙管凸起密封環(huán)，該試紙管凸起密封 環(huán)與插入接口的試紙管外部凹槽配合成反向倒鉤密封結(jié)構(gòu)而不容易被打開；連接管沉孔形接口底部設(shè)有溶 液釋放結(jié)構(gòu)，它對溶液管底部結(jié)構(gòu)給予特定作用力即可將其斷裂脫離，溶液從溶液管釋放出來；連接管溶 液釋放結(jié)構(gòu)底部設(shè)有溶液通道，溶液管釋放出來的液體將經(jīng)過溶液通道流到試紙管中的層析試紙的樣品溶 液接收區(qū)； #p#分頁標題#e#

  3）試紙管：用于固定免疫層析試紙；所述試紙管是一端開口的中空長管；試紙管的開口端設(shè)有試紙 管凸起卡槽，用于安裝免疫層析試紙條時卡住并固定免疫層析試紙條；試紙管在插入連接管的接口部位設(shè) 有試紙管外部凹槽，該外部凹槽與連接管內(nèi)壁設(shè)的試紙管凸起密封環(huán)配合后反向倒鉤形成封閉環(huán)境，不容 易被再次打開。 

10.如權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述的封閉式層析試紙檢測裝置的溶液管的蓋子上設(shè) 有一沉孔形空腔，在該沉孔形空腔內(nèi)可插入另一個溶液管下部管體形成疊加套管結(jié)構(gòu)，并釋放出核酸擴增 反應(yīng)的產(chǎn)物溶液，實現(xiàn)同時檢測多管擴增完成的反應(yīng)液；所述溶液管蓋子的沉孔形空腔底部設(shè)有溶液釋放 結(jié)構(gòu)，溶液釋放結(jié)構(gòu)底部設(shè)有溶液通道；所述溶液管體下部外圓周面設(shè)有外部凹槽；靠近蓋子頂部的溶液 管蓋子內(nèi)壁面設(shè)有凸起密封環(huán)，該凸起密封環(huán)與插入蓋子沉孔形空腔內(nèi)的另一個溶液管的外部凹槽配合后 形成反向倒鉤密封結(jié)構(gòu)。 

11.如權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述試紙管末端部位設(shè)有環(huán)形凹槽，在用力達到一定 程度時，能從此環(huán)形凹槽部分折斷試紙管，便于對檢測樣品進行污染消除處理。 12.一種利用如權(quán)利要求7所述的試劑盒進行核酸檢測的方法，其特征在于，包括如下步驟： （1）采用核酸提取試劑進行核酸提??； 

a、取100～1000μl的液體樣本，加入300～4000μl裂解液，震蕩混勻后室溫靜置1～2min； b、加入350～4000μl洗滌液A，震蕩混勻后以10000～16000rpm離心3～5min，棄上清； c、加入350～1000μl的洗滌液B，震蕩洗滌使絮狀物溶解，隨后以10000～16000rpm離心1～2min， 棄上清，得沉淀； 

d、沉淀于室溫干燥，加入1-10μl的溶解液將沉淀溶解； （2）采用核酸擴增試劑進行DNA或RNA擴增； 

  將核酸擴增試劑中的液體試劑用移液槍或者一次滴管移**固體試劑的溶液管，充分溶解形成核酸擴 增反應(yīng)液；然后將1～10μl核酸提取試劑提取的DNA或RNA加入備好的核酸擴增反應(yīng)液中，依照不同的 核酸擴增方法進行擴增反應(yīng)，隨后恢復室溫終止核酸擴增； （3）利用核酸封閉式檢測裝置進行DNA或RNA檢測： 

a.將試紙管連帶免疫層析試紙條插進連接管與其匹配的接口中，密封不可拔出；b.將結(jié)束擴增的溶液管插入水平放置的封閉式層析裝置的連接管中通過旋轉(zhuǎn)溶液管，溶液管底部凸起 斷裂脫落，繼續(xù)完全插入溶液管，使溶液管外部凹槽與**連接管凸起密封環(huán)配合形成倒鉤結(jié)構(gòu)，該溶液 管將被該倒鉤結(jié)構(gòu)反向頂住呈不可拔出且密封狀態(tài)； 

c.擴增完的核酸擴增反應(yīng)液由溶液管底部和呈打開狀態(tài)的連接管內(nèi)部的切痕片流到免疫層析試紙條 上，開始核酸的膠體金層析免疫學檢測； 

d.從液體出現(xiàn)在硝酸纖維素膜上起開始計時，3-15min后免疫層析結(jié)束判定結(jié)果，在質(zhì)控線有可見條帶 的前提下，檢測線出現(xiàn)條帶說明檢測結(jié)果為陽性，檢測線沒有條帶說明檢測結(jié)果為陰性。 

13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，在步驟（3）之后增加如下核酸擴增產(chǎn)物無害化處理步 驟：將使用完畢后的封閉式層析試紙檢測裝置在試紙管的環(huán)形凹槽處折斷，同時將溶液管蓋子沉孔形空腔 底部的切痕片頂壓破裂，然后把全部組件浸入納米二氧化鈦溶液中，然后在紫外光的照射下降解封閉式層 析試紙裝置中的核酸擴增產(chǎn)物。 

14.如權(quán)利要求13中所述的方法，其特征在于，所述納米二氧化鈦包括：金紅石型、銳礦型，納米 二氧化鈦溶液的濃度為：0.5～5mg/ml；所述的紫外光波長范圍是200～420nm，照射時間為2～48小時。